1、当用螺旋的瓶口培养细胞的时候，将瓶口微松，保证瓶子能透气，能与培养箱中的气体进行交换，但是不宜太松，太松容易导致空气中的细菌落入污染细胞。
2、保证二氧化碳培养箱中的气体的无菌，定期要进行紫外线的消毒，但是不要在有细胞下进行，开关培养箱时候要尽量减少外界暴露时间。
3、保持二氧化碳培养箱中的气体的湿度，在水槽中加一半的灭菌的蒸馏水，也可以防止细胞培养液之中的二氧化碳挥发。
4、保持二氧化碳培养箱的温度在37度，5%的二氧化碳气体，相对于电热型的培养箱，要保持室温在25度，避免培养箱的温度感受器失灵
5、每隔几个月要对二氧化碳培养箱内的气压用二氧化碳测试仪测试，并且进行零点的调整，防止二氧化碳的气压零点漂移现象。
6、培养箱里边要放至少一个温度计，可以两个，作为二氧化碳培养箱的温度对照，来检测培养箱的温度感受器是否失灵等。
