灵芝三萜酸化学结构鉴定普遍采用近代分析技术：紫外光谱(uv)、红外光谱(IR)、质谱(MS)、核酸共振谱(氢谱、碳谱，1H-1·Heosy 谱、1H13C-NMR谱，Coloc潜、NoEcy谱等)、CD谱(旋光光谱)，X衍射分析等。
灵芝三萜酸化学结构鉴定近代分析技术
1、紫外光谱：灵芝三萜类化合物结构中存在有共轭体系，紫外吸收均有一定规律。凡在C11位存在羰基(〉CO)化合物都存在△8(9)双键，其紫外最大吸值在λmax、237nm，244nm，250nm处，而吸收强度大多在logε3.7—4.1之间，在化合物中，既没有α，β不饱和酮，又没有共轭双键的活，其紫外光谱仪表现末端双键吸收，一般在λmax210nm(logε4.2)左右。
2、红外光谱：3300cm-1，1050 cm-1(-OH基，强)2600cm-1-2400cm-1(弱吸收)。在C15位上有羰基(〉CO)化合物，在1740 cm-1～1760cm-1(五员环酮)，1720cm-1，(酯)1710cm-1·(六员环酮)，1650cm-1(α，β-不饱和酮)(较强吸收)。
3、质谱：四环三帖灵芝酸衍生物，裂解共同特征易失去侧链(side chain)。 1986年日本Kikuchi T等对四环三萜灵芝酸研究中，其裂解方式及具主要碎片如图5—5所示。羊毛甾类的特征裂解是从D环断裂，伴有一个质子的转移，然后经第二次裂解和D环的一部分。
4、核磁共振谱：灵芝酸R、S、T、X、Y(ganoderic acid R、S、T、X、Y)双键位置△7烫喇霰嘴(8)和△9(11)。 环上：7-H：δ(ppm)在5.48-5.86(双键) 11-H：δ(ppm)在5.31-5.39(双键) 侧链双键位置20-H(δ) ppm 6.04-6.12△20(22)灵芝-22-烯酸A、B、C、D等(ganoderenlc acld A、B、C、D等),24-H(δ)ppm，5.4-5.7(△24(25))丹芝醇A、B(ganoderol A、B)。 13C-NMR：在△8(9)化合物中，C8在δ151-160ppm， C9在δ140-146ppm △7(8)△9(11)化合物中C7在δ120-121ppm C8在δ140-142ppm C9在δ141-145ppm C11在δ115-117ppm 侧链上的双键位置，(1)△20(22)，C20在δ154-157ppm，C22在δ124.3-124.7ppm。(2)△24(25)，C24在α139-145ppm，C25在δ126-129ppm。 在三萜酸结构中，各碳链连有羟基时，它们的化学位移值分别为C3δ77-79ppm，C7δ66-68ppm，C12δ77-79ppm，C15δ72-74ppm。当三萜酸中含有羰基时，它们的化学位移值分别为C3δ215-216ppm，C7δ198-200ppm，C15δ205-217ppm，δ207-208ppm，羧酸酯的化学位移值在δ170-272ppm。C3，C7，C15取代基不同时，对与其连碳的化学位移值影响较大，C3连有羰基时C1在δ27ppm，C2在δ34.1-34.8ppm，C4在δ46-47ppm，山为羰基取代时，C6在δ33-37ppm，C7为羟基时，C6在δ26-28ppm，C15为羰基时，C14在δ57-59ppm，C15为羟基取代时，C14在δ52-53ppm。
5、良旋光光谱：Nishitoba T等在确定环氧灵芝醇A(epox鲻戟缒男yganoderiol A)的绝对构型时，应用CD谱测定了C24和C25的绝对构型。盐淬芪求该化合物的侧链上存在一个环氧基团，为了确定C24和C25位是S还是R构型，以羊毛甾醇为原料，经合成得到S和R两种构型的化合物(见图5—6)。 分别将7a，7b溶于四氯化碳溶液中，加入Eu(fod)3络合物，测其旋光光谱(CD谱)，其结果见图5—7。 上述两个化合物7a、7b的CD谱的Cotton效应是与C25的纽曼(New man)投影相一致的。正Cotton效应为25S，负Cotton效应为25R。在相同条件下测定环氧灵芝醇A(epoxyganoderiol A)，从CD谱中显示314nm(△ε11.8)为正Cotton效应，证明25位的绝对构型为S。通过测定该化合物NOE，证实24位绝对构型为s。因此，环氧灵芝醇A的侧链结构C24、C25的绝对构型就确定下来，其结构见图5-8。 1998年Toyama医科、药科大学中日传统医药研究所Min B S等定量测定5种灵芝子实体(鹿角型)及孢子的化学成分(HPLC法)，分析表明孢子中灵芝醇(gan-odericalchol)及灵芝酸(ganoderic acid)均非常高。作者早期报告的新三萜酸灵芝酸α(ganoderic acid α)，(从灵芝子实体中提得)及12种已知化合物，其中丹芝醇F(gan-oderol F)及灵芝萜酮三醇被发现对抗人类免疫缺陷病毒(抗艾滋病毒)显示活性。作者继续从天然产物寻找新的抗艾滋病药物，发现灵芝孢子甲醇提取物的氯仿可溶部分有明显的抗艾滋病毒-I蛋白酶(anti-HIV-1-protease)活性，其抑制率为47%(100μg·ml-1)。从孢子中鉴定了10个羊毛甾烷型三萜(lanostane-type triterpenes)，HPLC测定5种不同地区(样品I-V)(鹿角状)，分离7种化合物经鉴定分别为灵芝萜酮二醇、灵芝醇F(ganoderiol F)、灵芝萜酮三醇、灵芝酸A(ganoderic acid A)、灵芝酸B(gan-oderic acid B)、灵芝酸C1 (ganoderic acid C1)及丹芝酸A(ganolucidic acid A)。
