1、 离体蟾蜍心脏的制备(1)取一蟾蜍毁其脑和脊髓,仰位固定于蛙板上,幌垫哨蒯暴露心脏的方法同实验9。(2)心脏插管 分支前的主动脉下穿一线并打一松结备用 ,左侧主动脉穿一根线并结扎之,用左手提起结扎线,右手用眼科剪在左侧主动脉距分叉部3mm处剪一“V”型口。将盛有少量任氏 液的蛙心套管(用拇指将套管堵住,以防套管中的任氏液流出)从“V”型口插入动脉球底部,然后稍后撤套管,再转向心室中央方向插入,可见液面随心搏升降即可。将分支前主动脉下的松结扎紧,并固定在套管的小突上。小心提起套管和心脏,剪断主动脉左右分支;结扎与静脉窦相连的后腔静脉,并在结扎线以下剪断,将心脏摘出。(3)用铁支柱上的试管夹夹住套管、蛙心夹夹住蟾蜍的心尖。将蛙心夹的线与万能杠杆相连,(蛙心夹与换能器和二道仪连接亦可),描笔尖上与记纹鼓面接触即可观察(图6-11-1)。
2、 观察项目(1)开动慢鼓描计一段正常心搏曲线,注意观察心跳频率和强俣觊鄄幼度以及心脏的收缩、舒张程度。(2)把蛙心套管内任氏液全部换为0.65%NaCl溶液,观察心跳变化。(3)把0.65%NaCl溶液吸出,换以任氏液,加入3%CaCl2溶液1~2滴,观察心跳变化。(4)把含3%CaCl2的溶液吸出,换以任氏液,加入1%KCl溶液1~2滴,观察心跳变化。(5)把含KCl的溶液吸出,换以任氏液,加入0.01%肾上腺素溶液2~3滴,观察心跳变化。(6)把含肾上腺素的溶液吸出,换以任氏液,加入0.01%乙酰胆碱溶液1~2滴,观察心跳变化。(7)把含乙酰胆碱的溶液吸出,换以任氏液,加入3%乳酸溶液1~2滴,观察心跳变化。待心跳变化明显时,立即加入2.5%NaHCO3溶液1~2滴,观察心跳逐步恢复。注意事项
3、避免过度牵拉静脉窦,否则离体后的心脏可能出现搏动异常;
4、注意保留静脉窦的完整性,为防止误伤静脉窦,剪取心脏时可将剪尖朝下进行剪切;
5、蛙心离体后若搏动不良,蛙心管内液面不波动,多为固定线牵拉过紧所致,可用眼科镊夹住扎线处稍稍向下移动蛙心即可;
6、注意常用任氏液湿润蛙心表面。