1、首先配置冷冻液：10%DMSO+90%胎牛血清，可以在4摄氏度冰箱内预冷就行。
2、用胰酶对细胞进行消化，倒去培养瓶中的培养基或用枪小心吸去培养板中的培养基，PBS冲洗两次，用胰酶消化细胞。
3、再次使用培养液悬浮细胞，将预冷的冻存液加入消化完全的细胞中，紧接着用滴管混匀。
4、每支冻存管中加入1ml细胞液，密封后标记冻存细胞名称和冻存日期。
5、液氮罐做年检的方法：液氮是一种无色无味的液体，液氮罐和杜瓦罐都是静态储存器，但是不同的是杜瓦罐是一种氮气瓶，液氮罐是一种小型的静态储存容器，不用加压，所以我们使用的时候不用年检，但是我们液氮罐上的压差液位计是需要年检的，如果不年检是影响液氮罐正常使用的。