小鼠骨髓细胞染色体畸变实验

时间:2024-10-22 02:53:14

1、染毒:CP(环磷酰胺)腹腔注射(100mg/kg)一次

小鼠骨髓细胞染色体畸变实验

2、细胞周期同步化:处死前2-3小时腹腔注射秋水仙碱400mg/L,4mg/kg

小鼠骨髓细胞染色体畸变实验

3、取样:双侧股骨→PBS(pH6.8)5ml冲洗骨髓腔→离心1500rpm/min离心十分钟→弃上清

小鼠骨髓细胞染色体畸变实验

4、低渗:0.075M KCl6ml,37°c孵育15分钟→加入固定液1ml预固定1分钟→离心1000rpm/min十分钟,弃上清

5、固定:固定液4ml,37°c孵育20分钟→离心十分钟(1000rpm/min),弃上清。重复一次步骤5.

6、制片:试管内余下约0.5ml,冰冻玻片滴片,干燥。

小鼠骨髓细胞染色体畸变实验

7、染色:使用Giemsa染液染色3分钟。

小鼠骨髓细胞染色体畸变实验

8、阅片:油镜下计数100个中期相细胞,畸变细胞率

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